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小脑颗粒细胞
小脑颗粒细胞
Product Introduction
1.产品名称:小脑颗粒细胞
2.组织来源:小脑组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小脑颗粒细胞分离自小脑皮层组织;神经元是神经系统最基本的结构与功能单位,小脑颗粒神经元是体积较小的神经元,直径约10μm,在中枢神经系统中含量非常丰富,近乎神经元数量的一半。由于小脑神经元的生长、分化和大脑皮层神经元相似,而且数量多、便于取材,因此小脑颗粒神经元是研究神经元生长发育、神经轴突再生及神经疾病发生机制和临床神经药理的重要手段。小脑颗粒神经元是小脑主要的中间神经元,在哺乳动物的小脑内数量最为丰富。颗粒神经元的轴突与苔状纤维和爬行纤维相联系,形成小脑皮层内的神经元环路,在小脑的神经活动中起着非常重要的作用。在动物传染性海绵状脑病中,病变可波及小脑颗粒神经元,导致小脑皮层的神经元环路受损,从而呈现神经性行为失调。研究小脑颗粒神经元在动物传染性海绵状脑病病理学变化中的反应、病理发生的机理特别是分子机理,有赖于小脑颗粒神经元细胞模型的建立。小脑颗粒细胞的轴突是沿冠状轴分布的平行纤维,正是这种排列保证了兴奋的单向传导,这是小脑功能理论中的关键假设,小脑颗粒细胞通过g-氨基丁酸接受戈尔吉细胞的抑制性突触的信息传入。
本公司生产的小脑颗粒细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经β-Tubulin/MAP-2免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
Neurobasal-A、B-27、Penicillin、Streptomycin等
同时,YBio还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。 

二.使用方法 

1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作: 

取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置4-6小时或过夜,以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。 

2、细胞传代: 

1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min; 

3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 

4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存: 

1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落,再加入完全培养液终止消化,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min; 

3)用适当量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中; 

4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。 

    

4、细胞复苏: 

1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁; 

2)将冻存管中的细胞移至15ml无菌离心管中,滴加入完全培养液5ml混匀细胞,然后将细胞悬液转移至适当面积大小的培养皿中; 

3)放置于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 

4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。 

  

三.注意事项 

1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月; 

2、在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作; 

3、原代培养的细胞,不建议多次传代后进行实验。如果您的实验时间较长, 请在收到细胞后传代时,按细胞量分种2瓶,使用其中的一瓶细胞实验,其余的细胞先冻存起来。下次实验需要时,再复苏; 

4、该细胞只可用于科研;



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