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RPMI-1640是Moore等人于1967年在美国纽约州法罗市的罗斯韦尔公园纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute, RPMI)开发出来的,RPMI是该研究所开发的一类细胞培养基,1640是培养基代号。RPMI-1640是改进型的McCoy's 5A培养基,使用碳酸氢盐缓冲系统,与大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基最初是为淋巴细胞培养专门设计的,现在已广泛应用于各种正常细胞和癌细胞的培养,尤其是悬浮细胞的培养,是使用最为广泛的培养基之一。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。细胞利用其机制是:在细胞培养时,细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似,连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,即节省了时间也节约了金钱。与添加 L-谷氨酰胺的培养基中培养的细胞相比,活性降低得更慢。 延滞期略微延长的原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间。
HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。
酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值7.2~7.4时为红色,最适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类激素(特别是雌激素)的作用,因此在用到雌激素敏感的细胞时(如乳腺组织),最好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。
本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分;但不含蛋白质、脂类或任何生长因子;故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。
成分说明
形态
液体
浓度
1×
规格
500mL
PH
7.2~7.4
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺
2mM
NaHCO3
2000mg/L
D-葡萄糖
2000mg/L
HEPES缓冲剂
25mM
酚红指示剂
无
储存条件
2℃~8℃,避光
运输条件
常温
有效期
12个月
注意事项
1、本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;
2、为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行冻融处理;
3、本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
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