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细胞染色的方法和步骤


Author:YBIO
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细胞染色的方法和步骤

 细胞的染色一般是为了鉴定细胞,以下是细胞染色的方法和步骤:

HE染色

1. 脱蜡复水: 石蜡切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各5min,然后放入100%、95%、90%、80%、70%各级酒精溶液中各3-5min,再放入蒸馏水中3min。
2. 染色:切片放入苏木精中染色约10-30min。
3.水洗:用自来水流水冲洗约15min。使切片颜色变蓝(或放入碱性水中也可),但要注意流水不能过大,以防切片脱落。
4.分化:将切片放入1%盐酸乙醇液中褪色,约2秒至数十秒钟。见切片变红,颜色较浅即可。
5.漂洗:切片再放入自来水流水中使其恢复蓝色。
6.脱水Ⅰ:切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各3-5min。
7、复染:用0.5%伊红乙醇液对比染色1-3min。
8.脱水Ⅱ:将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色,然后放入无水乙醇中3-5min。最后用吸水纸吸干多余的乙醇。
9.透明:切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各3-5min。

10.封藏:中性树胶封存


Giemsa染色
1.根据需要量,取8ml双蒸水,加入姬姆萨原液1ml,再加入姬姆萨稀释液1ml,再加入姬姆萨稀释液1ml,混匀即为工作液,此工作液常温可保存两周。
2、按常规方法将石蜡切片脱蜡水化,PBS清洗。
3、将切片放到染色架上,滴加2-3滴染色工作液,使覆盖全部组织,室温染色15-30分钟。

4、用自来水缓慢从玻片一端冲洗,晾干后镜检。

 

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