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pDC315
Product Introduction
pDC315
| 质粒类型: | 腺病毒载体 |
|---|---|
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 启动子: | MCMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3913 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | pDC315F: acg tgg gta taa gag gcg |
| 3' 测序引物及序列: | pDC315R: cga tgc tag acg atc cag |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 备注: | pDC315和pDC316的区别在于多克隆位点的差异 |
pDC315 含有以下元件：
- Ampr: 为质粒在E.coli（如DH5α）中扩增提供氨苄抗性（终浓度100μg/ml）。
- ori：质粒在E.coli 中的复制起点。
- Ad：Ad 序列，主要由Ad 可以与Ad 基因组质粒发生同源重组。
- ITR：Ad 反向末端重复序列，是Ad 基因组的包装识别信号。
- MCMV：来自小鼠CMV 病毒的启动子。
- SV40 polyA：来自SV40 病毒T 抗原的mRNA 加尾信号。
- loxP：真核重组酶（Cre）的重组识别序列。
通过pDC315 构建重组腺病毒的用户须知
- 为了确保病毒包装的目的基因能够正确表达，用户需对自己构建的带有目的基因的pDC315 进行酶切鉴定，并建议进行测序验证，保证克隆的基因正确。
- 由于pDC315 本身是一种真核表达载体，转染细胞即可介导目的基因的表达，因此建议有条件的用户在完成质粒构建后，将其转染细胞，通过ELISA、免疫组化或Western 的方法来检测目的基因的表达，以及检测目的基因表达后的生理活性。这样可以进一步增加实验成功的把握。
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