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pPIC3.5
Product Introduction
pPIC3.5
| 质粒类型: | 毕赤酵母表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 启动子: | AOX1 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 7751 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´ |
| 3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | HIS4 |
| 备注: |
插入基因是必需包含起始密码子ATG。
|
pPIC3.5酵母表达载体详细信息如下:
- 载体大小为7,751 bp，是非融合蛋白表达载体。
- 单一限制性内切酶位点有BamH I, SnaB I, EcoR I, Avr II 和Not I.
- 胞内基因表达载体，不是分泌性蛋白表达载体。
- 载体构建时，需要包含一个ATG启动子，同时需要加入Kozak序列。 (Cavener and Stuart, 1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990)
- 毕赤酵母中使用HIS4基因筛选。
- 将基因插入GS115和KM71的AOX1中，需要使用Sac I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+，KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。
- 将基因插入GS115和KM71的HIS4中，需要使用Sal I或 Stu I线性化质粒(GS115产生的基因型为His+ Mut+，KM71酵母产生的基因型为His+ MutS)。
- 将基因插入GS115的AOX1基因中，也可以使用Bgl II 限制酶线性化质粒，产生的酵母基因型为His+ MutS。
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