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ELISA常见问题

Author:YBIO
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1. 产品有哪几种规格？可检测多少个样本？

产品分为48T和96T两种规格。

每次实验的标准曲线一般设7个不同浓度，加上空白孔，标准曲线一共需要8个孔。因此，一个48T试剂盒最多可以测定40个样本（不做重复且一次用完），一个96T试剂盒最多可以测定88个样本（不做重复且一次用完）。可以根据实际样本数量和实验计划选择合适的产品规格。

2.48T和96T的试剂盒有哪些不同？

48T和96T的试剂盒，每个孔的反应体系都是完全一样的。不同的是试剂盒中各组分的规格，详见说明书。

3. 产品的稳定性如何？

产品在研发前期已通过严格的稳定测试，发货前亦须通过检测并提供质检报告，在市场上深受广大客户的赞许！

4.贵公司有没有酶活性检测的试剂盒？

酶活力的测定实际上就是测定酶促反应的速率。酶活力的大小即酶含量的多少，可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表示，单位是U/g或U/ml。酶活力的测定方法：⑴测定完成一定量反应所需的时间，⑵测定单位时间内酶催化化学反应量。主要通过产物的增加量或底物的减少量来测定。常用的方法有：⑴分光光度法，⑵荧光法，⑶同位素测定法，⑷电化学法。

ELISA的方法一般是对可溶性抗原或抗体进行定性和定量的检测，所以酶活性是不能用ELISA来检测的。

5.一次ELISA实验需要多长时间？

双抗体夹心ELISA法一次实验需要4-4.5小时，竞争ELISA法一次实验需要2-2.5小时。

6.血清样本如何处理？

全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

7. 血浆样本如何处理？

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，于1000×g离心15分钟，仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

8. 尿液样本如何处理？

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

9.细胞上清液样本如何处理？

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（1000×g）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右（5000×g）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

10. 组织样本如何处理？

用预冷的PBS (0.01M,pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。

11.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法？

小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗体上的结合位点，标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的生物素化抗体愈少，最后的显色也愈浅，即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。

12.用什么软件处理ELISA检测的数据比较好？

ELISA标准曲线拟合可以应用Curve Expert软件进行数据分析。它使用非常方便，可以生成漂亮的曲线应用到论文之中。软件可以在下载中心进行下载。

13. 试剂盒做的结果不理想怎么办？

实验结果不理想请及时与客服或技术支持联系，我们可以帮您一起分析实验结果。如果仅凭实验数据无法判断，您可以将试剂盒发回给我们进行售后检测。如果是试剂盒本身的质量问题，可以为您退换货；如果是实验操作的问题，技术人员可以给您一些改进的建议。

14.使用Elabscience ELISA Kit发表论文有奖励吗？

如果您使用我公司的ELISA Kit且已发表论文，可以获得500～2000元奖学金或代金券，具体奖励政策请咨询销售人员。

15.怎样处理elisa实验结果？

1.ELISA实验中样品都要做复孔或三孔，然后计算每个浓度标准品的平均OD值，复孔的变异系数应该小于20%。

2.平均OD值减去空白孔的OD值。

3.制作标准曲线。

以减去本底后的OD值为X轴，标准品的浓度为Y轴，利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图，比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法（比如直线、半对数、对数、四参数方程等）并从中选择一条最合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合，可以将标准品的浓度作为未知数，将对应的OD值带入该方程，计算出标准品的浓度，得到的结果应该与实际浓度很接近（+/-10%）。选择拟合度最高的那条曲线。