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ELISA试剂盒注意事项和操作过程


Author:YBIO
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ELISA试剂盒注意事项和操作过程


ELISA试剂盒注意事项:
1.此试剂为体外检测试剂,效期内运用,试剂应视为感染物,不同总批号的试剂不能混用。
2.运用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟。
3.浓缩洗刷液呈现结晶后.请于37°C孵育15分钟。
4.浓缩样品稀释液呈现结晶后.请于3 7 °C孵育 15分钟。
5.若24小时内进行试验.标本可存放于2〜8℃。不需及时试验.标本-20℃保存,防止反复冻融。
6.在反复清洗微孔板.并扣干微孔中的残余液体.否则将下降**度.造成吸光度违背的假像。
7.加样结束后.应注意细微摇摆微孔反响条.以便使孔中的液体充沛混匀。
8.试剂盒保存于2〜8°C. 请勿冷冻,有效期请见盒内标明。
ELISA试剂盒操作过程:
1.取出酶标板,设空白孔,按照次第对应别离参加100μl的规范品于空白微孔中(空白孔视为0号规范品,用医用蒸馏水代替)
2.别离标记样品编号,参加100μl的稀释样品于空气微孔中(不同的样本选用不同的吸头)。
3.将酶标板置于37℃温育30分钟
4.将酶标板板取出,将其间的液体甩去,每个孔中悉数加满使用洗刷液后,当即甩去液体。
5.每个孔中加满使用洗刷液后,细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去,在吸水纸大将酶标板拍干。
6.重复第5个过程5次,在吸水纸大将酶标板拍干。
7.在规范品孔和样品孔中参加的100μl的酶标巧合溶液。
8.将96孔板置于37℃温育30分钟。
9.将酶标板取出,将其间的液体甩去,每个孔中悉数加满使用洗刷液后,当即甩去液体。
10.每个孔中再次加满洗刷使用液后,室温细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去,在吸水纸大将酶标板拍干。
11.重复第5个过程5次,在吸水纸大将酶标板拍干。
12.在每个孔中参加底物A 50μl后当即参加底物B 50μl。悄悄振动混匀。(A液.B液使用不同的吸头加样)
13.将酶标板置于37℃避光温育反响15分钟。
14.每个微孔中参加50μl的停止液,悄悄振动混匀。
15.在酶标仪上,450nm处测定OD;显色后,15分钟内进行测定。
16.依据制备的规范曲线,核算样本含量。







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