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T7 RNA polymerase
T7 RNA polymerase
Product Introduction

T7 RNA polymerase

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

T7 RNA polymerase (50 U/μL)

YB039K

5000 U

532.00

YB039K

25000 U

2132.00

YB039K

50000 U

3832.00


产品描述

产品是噬菌体T7 RNA聚合酶, 以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。


产品组分

编号

组分

产品编号/规格

YB039K(5000 U)

YB039K(25000 U)

YB039K (50000 U)

10618-A

T7 RNA polymerase (50 U/μL)

100 μL

500 μL

mL

10618-B

10×Transcription Buffer 

400 μL

1 mL ×2

4 mL

注:10×Transcription Buffer中含60 mM MgCl2100 mDTT,但不含有NTP,如需请购买本公司NTP set solution 10133


产品应用

1. 单链 RNA合成(包括siRNA等各类RNA前体及RNA探针)

2. Cap analog)为引物合成Capped mRNA 


酶活定义

 37℃、pH8.0 的条件下1 小时内使 1 nmol 的 [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为 1 个活性单位。


运输储存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期一年。


质量控制

核酸内外切酶残留检测:100 U的本酶和0.6 μg λ DNA-Hind III酶切产物37℃下孵育16 h,DNA的电泳谱带不发生变化。


RNase残留检测:100 U的本酶和1 μg 酵母RNA在37℃下孵育1 h,RNA的电泳谱带不发生变化。

大肠杆菌DNA残留检测:100 U本品经E.coli 16s rDNA特异性的TaqMan qPCR检测,E.coli基因组残留低于10拷贝。


注意事项

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


应用实例

按下列体系配制反应体系,37℃反应1-2个小时。

组分

体积μL

终浓度

10×Transcription Buffer (Mg2+ Plus)

2

CTP / GTP/ ATP/ UTP (100 mM each)

0.4 each

2 mM each

T7 RNA Polymerase (50 U/μL)

0.5-1

-

RNAse inhibitor (40 U/μL)

1

-

RNase free H2O

Up to 18

-

模板DNA

2 (100 ng-1μg)

-

注: 1. DNA模板需要最后加入。由于1Buffer中含有亚精胺,亚精胺浓度过高会引起DNA模板沉淀。

        2. Buffer和水建议放置到室温,然后开始使用,防止温度低引起亚精胺沉淀高浓度DNA模板。

3. RNAse inhibitor (40 U/μL)请购买本公司产品10603

4. 为了特定区域的有效转录,建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。


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