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细胞活性检测方法有几种 你知道嘛?


Author:YBIO
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前段时间小编非常好奇“怎么判断细胞是死的还是活的”
小编下面就为您介绍“细胞活性检测”有哪几种方法?
1、染色排除法;
2、还原性染料检测法;
3、荧光酯酶底物检测法;
4、线粒体膜电位检测法。

1、染色排除法
染色排除法是生物研究中判断细胞活性的一种常用方法,
原理:因为活细胞的细胞膜具有选择透过性,细胞不需要的物质通常不能进入细胞,染色剂中如台酚蓝就不能进入细胞,因此用该染色剂处理细胞后,细胞不会被染色,由于死细胞的细胞膜是全透性的,因此台酚蓝能进入死细胞,从而可以使死细胞染色。依此染色便可以判断细胞的活性。
2、还原性染料检测法;
氧化还原活力是与细胞代谢/种群存活细胞相关联的。使用发光/荧光指示剂,WST-8 和刃天青,以监测细胞的代谢活性。WST-8 和刃天青的低细胞毒性便于需要更长孵育时间的测定。

3、荧光酯酶底物检测法
细胞渗透型酯酶底物通过测量细胞酶活性和膜完整性来确定细胞活性。在扩散到活细胞中后,细胞内酯酶将所述底物水解成荧光化合物,该荧光化合物能够保留在细胞内一段时间,产生的信号强度与活细胞数量成正比。可以使用荧光仪器监测。

4、线粒体膜电位检测法。
在凋亡研究的早期,从形态学观测上线粒体没有明显的变化。随着凋亡机制研究的深入,发现线粒体凋亡也是细胞凋亡的重要组成部分,发生很多生理生化变化。例如,在受到凋亡诱导后线粒体转膜电位会发生变化,导致膜穿透性的改变。MitoSensorTM,一个阳离子性的染色剂,对此改变非常敏感,呈现出不同的荧光染色。正常细胞中,它在线粒体中形成聚集体,发出强烈的红色荧光。凋亡细胞中,因线粒体穿膜电位的改变,它以单体形式存在于细胞液中,发出绿色荧光。用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。CLONTECH公司的ApoAlert Mitochondrial Membrane Sensor Kit就采用这种原理来检测线粒体膜电位的变化。但是,这种方法不能区分细胞凋亡或其他原因导致的线粒体膜电位的变化。


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