YeaGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000×in Water)

产品信息

产品描述

YeaGreen是一种独特的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内，不易挥发升华，人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果也表明YeaGreen在凝胶染色浓度下完全没有诱变性，因此相对于EB的强致癌性是一种安全无毒的核酸染料。适用于各种大小片段核酸的电泳染色，对核酸迁移率的影响远小于SYBR Green I。适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶，室温下在酸或者碱性缓冲液中极其稳定，耐光性强。

YeaGreen适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA、ssDNA以及RNA染色，可选择胶染法或泡染法进行染色，使用非常方便灵活。同SYBR Green I的光谱性质，适用于使用471 nm激发的紫外凝胶成像透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

运输与保存方法

室温运输。4℃稳定保存，避免强光直射，有效期12个月。

使用方法

一、 胶染法（同EB，电泳前染色）

1）制胶时加入YeaGreen核酸染料（每50 ml琼脂糖溶液中加入5 μl YeaGreen 10,000×水溶液，以此类推）。

2）按照常规方法进行电泳。

注：
①此方法比较节省染料，500 μl染料大约可以做100块50 ml的胶。
②由于YeaGreen 具有良好的热稳定性，可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。
③YeaGreen兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
④如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。
⑤胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

二、 泡染法（电泳后染色）

1）按照常规方法进行电泳。
2）用H2O将YeaGreen 10,000×水溶液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中，制成3× 染色液。（如将15 μl YeaGreen 10,000×水溶液和5 ml 1 M NaCl加到45 ml H2O中）。
3）将凝胶小心地放入合适的容器中，缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30 min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10%聚丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30 min到1 h，并随聚丙烯酰胺含量增加而延长。

注：
①用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
②3×YeaGreen染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。

注意事项

1）关于核酸染料相关产品的选择：
如果您使用紫外成像仪，建议选择YeaRed（Cat#10202ES76）-EB核酸染料的无毒替代品，具有同EB相同的光谱特性；如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测，请选择YeaGreen，在凝胶染色中是SYBR Green I的完美替代品，安全无毒。YeaGreen虽然具SYBR Green I 相似的光谱特性，且在凝胶染色方面效果优于SYBR Green I，但不建议用于qPCR。建议使用专为此用途设计的SUPER Green I（Cat#10206ES76）和RTGreen（Cat#10207ES76）。

2）少数情况下，质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低的问题，此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更适合。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。