High Sieving Agarose 高分辨率琼脂糖（PCR级)

产品信息

产品描述

琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。

本品为PCR级高分辨率琼脂糖，对PCR产物、小片段DNA具有较高的分辨率，适宜分离20 bp-800 bp的DNA片段，其分离效果可与聚丙烯酰胺相媲美。此外，还具有如下特点：1）易溶解，胶液更清澈，可以配制高达5%的凝胶；2）很低的背景；3）品质稳定等。

琼脂糖的基本参数，包括：

1.）硫酸盐含量（sulfate content）——纯度指标，因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团；

2.）凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；

3.）胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点。

4.）电渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

产品性质

运输和保存方法

室温运输。室温干燥保存。

使用方法

1）配制适量电泳及制胶用的缓冲液（根据电泳需要，配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液），倒入合适三角瓶中。

注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2）根据制胶量及凝胶浓度，加入准确称量的琼脂糖粉（总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量）。

3）在微波炉中加热溶解琼脂糖，设置中火加热至沸腾，保持胶液沸腾约30 Sec，戴上防热手套，移开三角锥瓶，小心摇动三角锥瓶，重悬未溶解颗粒，再次用高火加热1 min（或加热直至琼脂糖完全溶解）。请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，使琼脂糖胶液充分均匀。

注：必须保证琼脂糖充分完全溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

4）使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5 µg/ml，并充分混匀。

注：溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时，请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品（YeaRed 核酸染料，Cat# 10202），使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。

5）将琼脂糖溶液倒入制胶模具中，在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5 mm之间。

6）在室温下使胶凝固（大约30 min-1 h），然后放置于电泳槽中进行电泳。

注：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存 2～5 天。

琼脂糖浓度与DNA分离范围

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。