SUMO Protease - 蛋白与免疫 - 分子生物学 - 产品中心 - 上海钰博生物科技有限公司

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SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）标签蛋白，并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比，由于其识别序列长，所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性，且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力，例如温度（4-30℃）、pH（5.5-9.5）等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签，便于使用亲和层析的方法，去除SUMO蛋白酶，纯化目的蛋白。

产品组分

编号	组分名称	产品货号/规格
编号	组分名称	YB065D/100U	YB065D/500U	YB065D/1000U
20410-A	SUMO Protease	100 U	500U	1000U
20410-B	Protease Buffer	150 μL	750 μL	1.5 mL

产品性质

中文别名（Chinese synonym）	SUMO蛋白酶
英文别名（English synonym）	SUMO Protease
来源（Source）	大肠杆菌表达
标签（label）	多聚His标签
纯度（Purity）	经SDS-PAGE及HPLC分析，纯度> 90%
分子量（Molecular weight）	26.55 kDa
缓冲液组分（Buffer）	500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT
酶活（Enzyme activity）	1 U/μL
酶活定义（Unit Definition）	30℃，SUMO Protease 1小时酶切2ug含有酶切位点的融合蛋白，酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位，即1U。

运输和保存方法

干冰运输；长期储存于-80℃，或解冻后保存于-20℃。

使用方法

1. 在EP管中配制如下反应体系（建议）

组分	体积
融合蛋白	20 μg
10X SUMO Protease Buffer	20 μL
ddH2O	to 190 μL
SUMO Protease	10 μL
Total volume	200 μL

2. 30℃孵育，在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液，置于单独的EP管中。

3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。

4. 样品全部反应完毕后，样品煮沸5 min，取40 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。

【注】如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃，延长反应时间，并增加SUMO酶用量，以保证酶切效果。

表1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性

反应时间（h）	不同温度下剪切活性（%）
反应时间（h）	4℃	16℃	25℃	30℃
0.5	48	73	83	88
1	60	87	90	93
2	71	94	94	95
3	74	95	95	95