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phi29 DNA连接酶
phi29 DNA连接酶
Product Introduction




phi29 DNA连接酶


描述:phi29 DNA聚合酶是从嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus subtilis噬菌体phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶,在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。phi29 DNA聚合酶具有特殊的链置换和连续合成特性,可连续合成长达70kb的DNA片段。另外,该酶具有3’→5’外切酶校读功能,合成的DNA片段保真性高。该酶的外切酶活性较强,因此合成过程中对引物3’端进行修饰,以降低外切活性对引物的切割效应尤为必要。


储存:-20℃可保存 3 年。


使用注意事项
(1)1×phi29 Buffer:50 mM Tris-HCl pH 7.5,10 mM MgCl2,10 mM (NH4)2S04,4 mM DTT。必要时可单独额外添加终浓度 1 mM DTT 和 0.2 mg/ml BSA,可提高反应效率。
(2)该酶的最佳反应温度为 30℃。
(3)65℃ 10min 即可使该酶失活。
(4)根据实验类型需要,调整 dNTP 的浓度 100~500 μM。
(5)添加 Yeast Pyrophosphatase 可提高 DNA 产量。
反应引物 3’端的硫代修饰可避免引物降解。

注意:本产品仅供研究用,请勿用于人体及动物的治疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。

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