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DB3.1 热敏感受态细胞
DB3.1 Chemically Competent Cell
产品规格:
DB3.1 10×100μl
pUC19(control vector) 10pg/μl 10μl
基 因 型
F- gyrA462 endA1 glnV44 (sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB -,mB -)ara14galK2lacY1proA2rpsL20(Smr) xyl5 Δleu mtl1
简 要 说 明
DB3.1 大肠杆菌菌株基因组中含有 gyrA462 基因,赋予其对 ccdB 毒性基因的抗性,特别适 用于构建或扩繁含有 ccdB 基因的质粒载体(例 GATEWAY System vector),此菌株具有链霉素抗性。 High5TM系列 DB3.1 感受态细胞经特殊工艺制作,经 pUC19 检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
操 作 说 明
1. DB3.1 感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速 插入冰中),加入目的 DNA 并用指尖轻轻拨打管底混匀(避免用枪吸打),冰上静置 25 分钟。
2. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基(2YT 或 LB),混匀后 37℃,200 rpm 复苏 60 分 钟。 基 因 型 简 要 说 明 操 作 说 明
4. 5000rpm 离心一分钟收菌,留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。 5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。
注 意 事 项
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入目的 DNA 时应轻柔操作。
产品优势
1、蛋白表达:适合表达非毒性蛋白
2、效率高:可达到 107cfu/ug pUC19 DNA
3、稳定性好:-70 度冰箱可保存 6 个月时间
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