BJ5183-AD-1 感受态细胞 

BJ5183-AD-1 Chemically Competent Cell

产品规格:

BJ5183-AD-1 10×100μl

pCAMBIA2301(control vector) 10pg/μl 10μl

基 因 型

endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (Strr) [pAdEasy-1 (Ampr)]

BJ5183-AD-1 是携带了腺病毒质粒 pAdeasy-1 的 BJ5183 菌株。BJ5183 菌株是一种具有较高重

组活力的大肠杆菌菌株，是目前腺病毒系统最常用的感受态细胞。BJ5183 菌株含有 sbcBC recBC 双重

突变，赋予 BJ5183 细胞较强的重组能力，有利于转入的目的基因与腺病毒骨架质粒的重组。endA1（缺

失核酸内切酶）的突变有利于重组 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。BJ5183-AD-1 菌株细胞中

已经提前转入了腺病毒质粒 pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)]，赋

予该菌株氨苄抗性，在病毒质粒构建时，只需转入线性化的目的质粒即可，简化了实验步骤，提高了病

毒质粒重组概率。Str

r 赋予 BJ5183-AD-1 菌株链霉素抗性。BJ5183-AD-1 感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301 质粒(size:1163bp)检

测转化效率>1×105cfu/μg DNA。

简 要 说 明

1. BJ5183-AD-1 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的质粒（含有

目标基因并线性化），并用手拨打 EP 管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置 25 分钟。

2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰中并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。 3.向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB)，混匀后 37℃，200 rpm 复苏 60 分

钟。4. 5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT

或 LB 培养基上。 5.将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中 8 分钟内加入目标 DNA，不可在冰中放置时间过长，长

时间存放会降低转化效率。 2. 混入目的 DNA 时应轻柔操作。 3. BJ5183-AD-1 菌株的质粒产量不高。腺病毒构建成功后，可选择在其他大肠杆菌菌株中扩繁，纯化

质粒。4. BJ5183-AD-1 感受态细胞对温度敏感，应储存在-80℃超低温冰箱，避免温度波动，温度波动会降低

感受态转化效率。

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃