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Rosetta-gamiB(DE3) 热敏感受态细胞
Rosetta-gamiB(DE3) 热敏感受态细胞
Product Introduction

Rosetta-gamiB(DE3) 热敏感受态细胞

Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell

产品规格:

Rosetta-gami B(DE3) 10×100μlpUC19(control vector) 10pg/μl 10μlF- ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pRARE (Camr, Kanr, Tetr)

基 因 型

Rosetta-gami B(DE3) 菌株聚合了 BL21,Tuner,Origami 和 Rosetta 四种菌株的优点: * lacY1 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突变赋予其 Tuner 菌株的优点——IPTG 以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个

细胞,产生更加严格、均一的浓度依赖。* pRARE 赋予其 Rosetta 菌株的优点——补充大肠杆菌缺乏的 6 种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)

对应的 tRNA,提高外源基因的表达水平。 * gor522::Tn10 trxB赋予其 Origami 菌株的优点——突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和谷

胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor)基因,它们是还原途径的两个关键酶,其突变有利于高效形成正确折叠的

含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。 

简 要 说 明

* 该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区 (DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶)适合 T7 启动子诱导的蛋白表达。

* Rosetta-gamiB(DE3)菌株具有卡那霉素,氯霉素,四环素抗性,由特殊工艺制作,经 pUC19 质粒

检测转化效率高达 108 cfu/μg DNA。

1. Rosetta-gamiB(DE3)菌株感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5 分钟后待菌块融化,加入目的 DNA 并用手

拨打 EP 管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置 25 分钟。 2. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB),混匀后 37℃,200rpm 复苏 60 分钟。4. 5000rpm 离心一分钟收菌,,留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含 34 µg/ml 氯霉素及所选质粒筛选

抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。-

产品优势

1、蛋白表达:适合表达非毒性蛋白

2、效率高:可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好:-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件: -80℃



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