B834(DE3)感受态细胞 

B834(DE3)Chemically Competent Cell

产品规格:

B834（DE3） 10×100μl

pUC19（control vector） 10pg/μl 10μl

基 因 型

F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm met (DE3)

简 要 说 明

B834 是 BL21 菌株的父系菌株。该系列宿主菌是蛋氨酸缺陷型，可以用来高水平，高特异性

的使用 35S-蛋氨酸和硒代蛋氨酸标记目的蛋白，进行蛋白质晶体结构研究。B834 宿主菌也是 lon 和

ompT 蛋白酶缺陷型菌株。

DE3 是溶源性的λDE3, 所以带有 T7 RNA 聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于 pET 系列载体，及其他

T7 启动子系列载体。

1. 取 100μl 冰上融化的 B834（DE3）感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。

2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基（2YT 或 LB），混匀后 37℃，200rpm 复苏 60 分

钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或

LB 培养基上。

操 作 说 明

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时，IPTG 浓度可选（0.1-40mM 均可）。

5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG 浓度需实验者优化。

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃