Rosetta-gami 2(DE3)感受态细胞

Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell

产品规格:

Rosetta-gami 2(DE3) 10×100μl

pUC19(control vector) 10pg/μl 10μl

基 因 型

D(ara-leu)7697 DlacX74 DphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F’[lac+lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pRARE2 (CamR, StrR, TetR)

Rosetta-gami 2(DE3) 菌株集合了 Rosetta 2 和 Origami 2 两种菌株的优点： ＊ pRARE2 赋予其 Rosetta2 菌株

的优点——补充大肠杆菌缺乏的 7 种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA 和 CGG)对应的 tRNA，提高外

源基因的表达水平。＊ gor522::Tn10 trxB 赋予其 Origami2 菌株的优点——突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和

谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor)基因，它们是还原途径的两个关键酶，其突变有利于高效形成正确折叠

的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性；同时该菌株不具有卡那霉素抗性，可用于具有卡那霉素抗性质粒的蛋白表

达。

简 要 说 明

＊ 该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区 (DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶)适合 T7 启动子诱导的蛋白表达。 ＊

Rosetta-gamiB(DE3)菌株具有氯霉素，链霉素，四环素抗性，由特殊工艺制作，经 pUC19 质粒检测

转化效率高达 108 cfu/μg DNA。

1. Rosetta-gami 2(DE3)菌株感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA 并用手

拨打 EP 管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置 25 分钟。 2. 2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。3. 向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB)，混匀后 37℃，200 rpm 复苏 60 分钟。

4. 5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含所选质粒筛选抗生素的 2YT 或 LB

培养基上。5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃