BL21-Star(DE3)pLysS 热敏感受态细胞

BL21 Star(DE3)pLysS Chemically Competent Cell

产品规格:

BL21 Star(DE3)pLysS 10×100μl

pUC19(control vector) 10pg/μl 10μl

基 因 型

F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)pLysS (CamR)

BL21 Star(DE3)pLysS 菌株来源于 BL21(DE3)，含有 rne131 突变（RNaseE 基因），RNaseE 基因的突变降低了內源

RNase 的积累，增强菌株细胞内 mRNA 的稳定性，从而提高异源蛋白的表达水平。主要适用于 T7 启动子表达载体(如 pET 系列)的高水平蛋白表达，同时含有大肠杆菌 RNA 聚合酶，也可用于非 T7 启

动子表达载体（pGEX，pMAL 等）的蛋白表达。由于 BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高，所以不适

合毒性蛋白的表达。 BL21 Star(DE3)pLysS 菌株携带 pLysS 质粒，具有氯霉素抗性。pLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，T7 溶菌酶可以作

用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，还可与 T7 RNA 聚合酶结合抑制其转录活性，进而降低目的基因的背

简 要 说 明

景表达水平，但不干扰 IPTG 诱导的表达。pLysS 质粒含有 p15A 复制起始子，可以和含有 pUC 或 pBR322 等复制起

始子的质粒兼容。BL21 Star(DE3)pLysS 感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化效率达 107 cfu/μg DNA。

1. BL21 Star(DE3)pLysS 感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的质粒并用手拨打

EP 管底轻轻混匀，冰中静置 25 分钟。2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。3. 向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB)，混匀后 37℃，200 rpm 复苏 60 分钟。 4. 5000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。-

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃