BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 热敏感受态细胞

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Chemically Competent Cell

产品规格:

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL 10×100μl

pUC19（control vector） 10pg/μ

基 因 型

F–ompT hsdS(rB–mB–) dcm+ Tetr galλ(DE3) endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuWStrep/Specr]

简 要 说 明

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL 菌株来源于 Stratagene 公司的 BL21-Gold 菌株，缺少 Lon 蛋白

酶和 OmpT 蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的 4 种稀有密码子( AGA、AUA、CCC、

CUA) 对应的 tRNA （argU、ileY、proL、leuW），提高外源基因，尤其是富含 AT-或 GC-的真核基

因在原核系统中的表达水平。

该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区（DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶），可同时表达 T7 RNA 聚合酶

和大肠杆菌 RNA 聚合酶，可用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，

链霉素，壮观霉素抗性。

High5TM 系列 BL21- Codon Plus(DE3)-RIPL 感受态细胞由特殊工艺制作，经 pUC19 质粒检

测转化效率高达 108cfu/μg。

1. 取 100μl 冰上融化的  BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL 感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混

匀，冰上静置 25 分钟。

操 作 说 明

2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基（2YT 或 LB），混匀后 37℃，200rpm 复苏 60 分

钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或

LB 培养基上。

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时，IPTG 浓度可选（0.1-2mM 均可）。

5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG 浓度需实验者优化。

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃