AGL1 化转农杆菌感受态细胞

AGL1 Chemically Competent Cell

产品规格:

AGL1 10×100μl

pCAMBIA2301（control vector） 10ng/ul 10ul

基 因 型

C58 RecA (rif R/carbR) Ti pTiBo542DT-DNA (strepR) Succinamopine

简 要 说 明

AGL1 菌株为 C58, RecA 型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因 rif 和羧苄青霉

素 抗 性 基 因 carb ， 为 了 便 于 转 化 操 作 ， 此 菌 株 携 带 一 无 自 身 转 运 功 能 的 琥 珀 碱 型 Ti 质

粒 pTiBo542DT-DNA ， 此 质 粒 含 有 vir 基 因 （ vir 基 因 是 T-DNA 插 入 植 物 基 因 组 必 需 的 元

件， pTiBo542DT-DNA 质粒自身的 T-DNA 转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体 T-DNA 顺利

转移）。

pTiBo542DT-DNA 型 Ti 质粒含有筛选标签：strep，赋予 AGL1 菌株链霉素抗性，适用于水稻、拟南芥、

杨树等植物的转基因操作，经 pCAMBIA2301 质粒检测转化效率可达 5×10

3cfu/μg。

1. 取-80℃保存的 农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。

2. 每 100μl 感受态加 1ug（体积不大于 10ul）质粒 DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置 5 分钟、

液氮 5 分钟、28℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟。

3. 加入 700μl 无抗生素的 LB 或 YEB 液体培养基，于 28℃振荡培养 2~3 小时。

操 作 说 明

4. 6000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 LB 或 YEB

平板上，倒置放于 28℃培养箱培养 2-3 天（当平板只含有 50ug/ml kan 时，28℃培养 48h 即可；平板中

同时加入 50ug/ml kan，20ug/ml rif 时，需 28℃培养 60h；如果使用的平板含有 50ug/ml rif 则需要 28℃培

养 72-90h）。

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃