Y1HGold 酵母感受态细胞 

Y1HGold Chemically Competent Cell

产品规格:

Y1HGold 10×100μl 保存条件：-80℃

pAbAi（control vector） 10ng/μl 10μl 保存条件： 4℃

Carrier DNA 5ug/μl 100 μl 保存条件： -20℃

PEG/LiAc 3.5 ml 保存条件： 4℃

基 因 型

MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1

Y1HGold 菌株是 Clontech 公司开发的 GAL4-AbA 酵母单杂系统用菌株，MATα型，可直接转化质粒进

行筛库试验。

Transformation marker 为: ura3，leu2；报告基因为：AbAr。Y1HGold -GAL4-AbA 酵母单杂系统需要

两种质粒配套使用：pAbAi 和 PGADT7。

质粒 pAbAi 的筛选标志为 URA，用于表达 pBait-AbAi construct (1~3 个 bait DNA 序列重复串联后克隆

到 pAbAi 中)；

质粒 PGADT7 的筛选标志为 LEU，用于表达 AD(GAL4 C 端 768 ~881 位氨基酸)与目标蛋白（Prey）

的融合蛋白。

GAL4-AbA 酵母单杂系统原理：Aureobasidin A (AbA)是一种环酯肽抗生素，在低浓度(0.1-0.2ug/ml) 下

即可对酵母产生毒性。

基因组中整合了 pBait-AbAi 的酵母菌株（Bait-Reporter Yeast Strains），当猎物蛋白（Prey）结合到诱

饵序列（Bait DNA）上，GAL4 AD 就会激活 AbAr 的表达，从而能够在含有抗生素 AbA 的培养基上生

简 要 说 明

长。AbAr 与营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点，可以降低酵母单杂假阳性发生的概率。

High5

TM 系列 Y1HGold 感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，经 pAbAi 质粒检

测转化效率>10

3cfu/μg DNA 。

1. 取 pBait-AbAi 质粒 5ug，BstBI 或 BbsI 酶切 1 小时，回收。

2. 取 100 μl 冰上融化的 Y1HGold 感受态细胞，依次加入预冷的线性 pBait-AbAi 质粒 1-5ug

（体积不高于 15ul），Carrier DNA（95-100 度 5min,快速冰浴，重复一次）10 ul ，PEG/LiAc 320ul

并吸打几次混匀，30 度水浴 30 分钟（15 min 时翻转 6-8 次混匀）。

3.将管放 42 度水浴 15min（7.5 min 时翻转 6-8 次混匀）。

4. 5000 rpm 离心 40s 弃上清，ddH2O 400ul 重悬，离心 30s 弃上清。

5. ddH2O 50ul 重悬，涂 SD/-Ura 平板,29℃培养 72h。

6. 挑取 5-10 个克隆，用 PCR 方法确定 pBait-AbAi 整合到 Y1HGold 基因组中，PCR 阳性菌株在 SD/-Ura

平板划线，29℃培养 72h，4℃保存，此菌株即是 Y1HGold[Bait/AbAi]菌株。

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃