蛋白胶微量回收试剂盒

产品及特点 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的微量蛋白胶回收法，它具有下列特点：

1. 简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。

2. 适用于变性胶（SDS-PAGE）和非变性胶。

3. 回收率一般在 50-90%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。

4. 跟后续的实验兼容，包括 2-D 电泳、质谱测序等。

规格及成分 成 份 编 号 小扁盒包装

蛋白胶微量纯化溶液 A 90402A 10 mL

蛋白胶微量纯化溶液 B 90402B 50 mL

专用研磨杵 80603 50 只

使用手册 90402sc 1 份

运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂 无

使用方法 1. 按常规方法进行变性（SDS-PAGE）或非变性蛋白电泳。

2. 切取含目的蛋白的胶（尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。

注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。

3. 将切下的胶块转移到 1.5 mL 塑料离心管中。

4. 用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。

5. 加入 200 uL 溶液 A，4℃摇晃洗脱至少 2-16 小时（过夜）。此时最好将溶液 B 放在冰箱预冷。

6. 10,000 g 离心 10 分钟，转移上清到新的离心管中，注意不要吸取碎胶。

7. 加入 5 倍体积的预冷的溶液 B，摇晃混匀。

8. -20℃放置至少 10-30 分钟。

9. 室温 12,000 g 离心 5-20 分钟，弃上清。

10.室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中，可用于后续实验（2-D 电泳、质谱测序等）。