MALDI蛋白样品处理试剂盒

产品及特点 本产品用于基质辅助激光解吸离子化（Matrix Assisted LaserDesorption Ionization，MALDI）分析，所含的基质液是 MALDI 分析的必不可少的关键成分，其主要作用一是起到分子溶剂的作用，使样品分子分开，但又不会使蛋白质发生共价修饰；而是能从激光脉冲中吸收能量，使蛋白质发生瞬间相变，用于质谱分析。本产品的特点是：

1. 即开即用，用户不需要单独准备各种成分。

2. 经过优化，可用于各种样品的 MALDI 分析。

3. 可以选择 CCA（羟基苯丙烯酸）、DHB（2,5-二羟基苯甲酸）和 SA（芥子酸）三种不同的基质。CCA 适用于分子量在 5Kd 一下的蛋白质和多肽分析（肽指纹图谱）；DHB 适合于一般蛋白质、多肽、低聚糖、脂和合成多聚物的分析；SA 适合分子量在 3Kd-150Kd 的蛋白质分析。 规格及成分 成份500 次包装（CAT#:111004-500）MS 专用溶解液 50 mL

基质液成份一 50 mg（干粉）

基质液成份二 10 mL

使用手册 1 份

运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。 自备试剂 MilliQ 水（可选）

使用方法 一：样品准备

1、 将蛋白样品真空冻干后加入 MS 专用溶解液 100 uL，溶解半小时（期间可以按下步配制基质液）。蛋白质的终浓度最好在 1-10 pmol/uL 之间。如果是 Reverse-Phase-HPLC 制备的样品，则可以不加 MS 专用溶解液而直接使用。注意：一定要在蛋白质样品真空冻干前将其中的缓冲液、盐、去污剂和变性剂等去除，否则它们会严重影响蛋白质晶体的形成，没有蛋白晶体的形成就不能进行 MALDI 分析。

2、 称量 1 mg 左右的基质干粉到一干净的 EP 管中，按每 mg CCA 加 100uL 基质液成份二的比例加入基质液成份二，混匀后离心。注意：此是用于结晶用的饱和溶液，可能有沉淀，故需要离心。注意：基质液最好新鲜配制。本试剂盒提供 50mg，足够配 50 次 200 uL 的基质液。

3、 选用下面两种上样法之一上样。也可以自选其他的上样方法。

二：Dried-Droplet 法上样

1、 将 1 uL 蛋白质样品与 1 uL 新配的饱和基质液混匀。注意：可以多做几个不同的蛋白质样品和基质液的比例，在 1:1-10:1 均可。

2、 用移液器将 1 uL 混合液点到 MS 仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净。注意：不要有气泡，枪头也不要触及靶面，也不能搅动上样后的混合液，在未结晶之前不要摇晃。样品靶必须充分清洗干净，以免上次试验的残留样品的干扰。

3、 如果样品中含有非挥发性杂质，在此步可以用自备的 MilliQ 水洗涤晶体一次。

4、 将样品靶插入质谱仪内，后续操作按 MALDI-TOF 仪器使用手册进行。

5、 同样方法处理自备对照样品（一般仪器厂家提供）。

三：Thin-Layer 法上样

1、 用移液器将 1 uL 基质液点到 MS 仪器的样品靶上，在基质液挥发前迅速进入下一步操作。

2、 迅速用移液器将 1 uL 样品点到 MS 仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净，一般需要 5 分钟。

3、 将样品靶插入质谱仪内，后续操作按仪器使用手册进行。

4、 同样方法处理自备对照样品（一般仪器厂家提供）。

5、 同样方法处理标准品（仪器厂商提供）。