超快蛋白银染试剂盒

产品及特点 蛋白质银染的原理是银离子(Ag+）可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使 Ag+还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色，其灵敏度比考马斯亮蓝高 100 倍。但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。为解决此问题，本公司推出本产品，其特点如下：

1. 超快，整个过程只需要不到 60 分钟。

2. 操作简单，只有固定（30 分钟）、染色（10 分钟）和显影（10 分钟）三步。

3. 灵敏度比考马斯亮蓝染色高 100 倍，能检测到 10ng 的蛋白质条带。

4. 三个成分中的两个都是现用现配，可重复性好。

5. 本规格可配制 1000mL 蛋白银染溶液 A（染色液），实际使用次数根据 PAGE胶大小不同而不同。

规格及成分 成 份 编 号 大纸盒包装

蛋白银染溶液 A 组分一（干粉） 100810a1 2 g

蛋白银染溶液 A 组分二，10× 100810a2 100 mL

蛋白银染溶液 A 组分三，10× 100810a3 100 mL

蛋白银染溶液 B 组分一，10× 100810b1 100 mL

蛋白银染溶液 B 组分二 100810b2 5 mL

使用手册 100810sc 1 份

运输及保存 常温运输及保存，有效期一年。

自备试剂 去离子水，乙醇和乙酸。

使用方法 一：配制银染固定液 100 mL （对 mini PAGE 胶）

1. 将自备的40mL 无水乙醇、10mL 乙酸和50 mL去离子水充分混合即可使用。

本试剂盒不含这些成分。

二：配制溶液 A

2. 需要配制的蛋白银染溶液 A（染色液）的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关，一般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制 100mL 蛋白银染溶液 A。如果配制的蛋白银染溶液 A 的体积不是 100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液 A 需要新鲜配制。

成分 用量

自备的去离子水 80 mL

蛋白银染溶液 A 成分一 0.2 g

蛋白银染溶液 A 成分二 10 mL

蛋白银染溶液 A 组分三 10 mL

三：配制蛋白银染溶液 B

3. 需要配制的蛋白银染溶液 B（显色液）的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关，一般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制 100mL 蛋白银染溶液 B。如果配制的蛋白银染溶液 B 的体积不是 100mL，则需按比例改变各成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液 B 需要新鲜配制。

成分 用量

自备的去离子水 89.5 mL

蛋白银染溶液 B 成分一 10 mL

蛋白银染溶液 B 组分二 0.5 mL

四：银染

4. PAGE 电泳或 SDS-PAGE 电泳结束后，将胶转移到装有 100 mL 银染固定液的瓷盘中，摇晃 30 分钟以去除干扰银染的成分（如甘氨酸、SDS、DTT、甘油等）。注：此步很重要，否则银染背景很高。

5. 用 100 mL 自备的去离子水漂洗 2 次，每次 2 分钟。

6. 将 PAGE 胶转移到适当体积的蛋白银染溶液 A 中，使蛋白银染溶液 A 在轻柔摇晃过程中能够淹没 PAGE 胶。室温摇晃处理 10 分钟。

7. 倒掉蛋白银染溶液 A，用 100 mL 自备的去离子水快速漂洗 2 次，每次半分钟。

8. 将 PAGE 胶转移到适当体积的蛋白银染溶液 B 中，使蛋白银染溶液 B 在轻柔摇晃过程中能够淹没 PAGE 胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现（一般需要10 分钟左右）。

9. 迅速将 PAGE 胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深，如果有必要保存胶，可以用自备的 5%的乙酸终止显色。技术资料 核酸和蛋白质银染注意事项

1. 银染主要出现在 PAGE 胶的表面，故用薄胶（0.5-0.75mm）可以提高灵敏度。

2. 对于考马斯亮蓝染色的 SDS-PAGE 胶，可用甲醇将胶漂洗后，继续进行银染。考染过程中的乙酸会干扰银染，因此要确保将 PAGE 凝胶中残留的乙酸彻底洗