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Hieff NGS® RNA Cleaner
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
Hieff NGS® RNA Cleaner |
YB021G |
1 mL |
366.00 |
YB021G |
5 mL |
1066.00 |
|
YB021G |
60 mL |
4266.00 |
|
YB021G |
450 mL |
38566.00 |
产品描述
本试剂盒利用独特的磁珠与缓冲液系统,可以特异性地吸附RNA,有效去除蛋白、盐离子和其它杂质。常用于纯化去除rRNA后的总RNA样本,体外转录的RNA产物,RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等实验。
运输与保存方法
冰袋运输。
2-8℃保存,有效期一年。避免冷冻!
使用方法
所需额外试剂:
100% 乙醇,Nuclease-free水,磁力架,Nuclease-free离心管。
实验前准备:
(1)将RNA clean beads 从4 ℃取出,平衡至室温(约30 min)。
(2)在一个Nuclease free PCR管中,用Nuclease-free水将0.5-5 μg总RNA稀释至50 μL。
RNA纯化:
(1)颠倒或涡旋振荡使磁珠充分混匀,吸取2×磁珠(100 μL)加入总RNA样品中(50 μL),用移液器吹打6次充分混匀。
(2)室温孵育5 min,使RNA结合到磁珠上。
(3)将样品置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心移除上清。
(4)保持样品置于磁力架上,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇,漂洗磁珠,室温孵育30 s,小心移除上清。
【注】漂洗时使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鲜配制,以防止引入RNase酶导致RNA降解。
(5)重复步骤4,共漂洗2次。
(6)保持样品始终处于磁力架上,开盖空气干燥磁珠5 min。
【注】磁珠开盖晾干时要避免过分干燥,如果磁珠出现龟裂,则提示磁珠过分干燥,此时RNA的洗脱效率会降低。
(7)将样品从磁力架上取出,加入12 μL Nuclease-free 水,用移液器吹打6次以充分混匀,室温静置5 min。
(8)将样品置于磁力架5 min,待溶液澄清后,小心转移上清10 μL至一个新的Nuclease-free PCR管中。
【注】建议转移上清时留2-3 μL液体,以免吸到磁珠影响后续实验。得到的RNA极不稳定,建议尽快进入下一步。若
要保存,请置于-80℃保存。
注意事项
1)磁珠使用前一定要平衡到室温后混匀,否则可能影响样品的回收效率。
2)操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。
3)80%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。
3)本试剂盒和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。
结果展示:
使用总RNA纯化试剂盒纯化前后,RNA样品qRT-PCR Ct值变化
RNA样品 |
人 |
小鼠 |
拟南芥 |
|||
检测基因 |
GAPDH |
β-Actin |
GAPDH |
β-Actin |
PP2A |
TUB2 |
纯化前Ct值 |
12.92 |
12.36 |
18.74 |
18.53 |
24.33 |
22.2 |
纯化后Ct值 |
12.32 |
11.89 |
17.62 |
17.91 |
23.38 |
21.35 |
【注】使用Hieff NGS® RNA Cleaner可以有效去除影响RT-PCR的抑制剂,让检测结果更加真实。
部门 |
姓名 | 手机 | |||
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