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2×Super Canace®Ⅱ Uracil High-Fidelity Mix for Library Amplification 2×Super Canace®Ⅱ耐U高保真文库扩增预混液
产品信息
产品描述
2×Ultima Amplification Mix是即用型2×预混合溶液,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,且完全克服了常规高保真酶无法以dUTP为原料进行聚合反应、无法使用含有dUTP的扩增引物及无法使用含有dUTP的DNA作为扩增模板等诸多弊病。进行文库扩增反应时,体系只需加入引物和模板,简化了实验操作步骤,减少了人为误差,提高了实验通量和结果的重复性。此外,本产品还添加了PCR增强组分,使得该酶具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性,非常适合复杂模板的扩增。
产品应用
基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库扩增。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA,37℃温育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测:50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。30个循环后扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
运输与保存方法
冰袋运输。
-20ºC保存。有效期一年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
文库扩增反应体系(冰上配制)
1. 将表1中试剂解冻后颠倒混匀,置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 PCR扩增反应体系
名称 |
体积(μL) |
2×Ultima Amplification Mix |
25 |
Primer 1 |
2.5 |
Primer 2 |
2.5 |
Adapter Ligated DNA |
20 |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液收集至管底。
4. 将PCR管置于PCR仪中,设置表2所示反应程序,进行PCR扩增。
表2 PCR扩增反应程序
温度 |
时间 |
循环数 |
98°C |
1 min |
1 |
98°C |
10 sec |
1~15(根据实验要求) |
60°C |
30 sec |
|
72°C |
30 sec |
|
72°C |
5 min |
1 |
4°C |
Hold |
- |
部门 |
姓名 | 手机 | |||
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