2×Hieff® C1P6 High GC Multiplex PCR Master Mix 2×C1P6高GC多重PCR预混液 - 高通量测序建库 - 分子生物学 - 产品中心 - 上海钰博生物科技有限公司

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本产品适用于多重PCR实验。2×Hieff^® C1P6 High GC Multiplex PCR Master Mix以热启动多重PCR酶制剂与2×扩增缓冲液为组分配置成预混液。本预混液可兼容GC含量在25%-70%左右的多重基因扩增，快速便捷地用于多重PCR反应，具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点。本试剂适用于不同多重PCR需求，可用于凝胶电泳鉴定20对以内不同大小片段的多重产物，也可用于进行数百重及以上扩增子的富集。

运输与保存方式

冰袋运输。-20℃储存，有效期1年。

参考反应体系

组分	体积（μL）	终浓度
2×Hieff^® C1P6 High GC Multiplex PCR Master Mix	15	1×
Primer mix	x	0.1 μM-0.5 μM
模板DNA	1 ng-400 ng	-
无菌超纯水	up to 30	-

【注】

1）上表中DNA量和引物浓度均为推荐用量和浓度，可根据具体实验情况进行调整最适浓度。

2）参考建议：每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。

3）预混液中已经包含扩增所需要的酶、dNTP、盐离子等，无需额外添加。

第一轮扩增程序

循环步骤	温度（℃）	时间	循环数
预变性	95℃	3 min	1
变性	95℃	20 sec	15-45
退火延伸	60℃	4-10 min	15-45
终延伸	72℃	5 min	1

【注】在PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应（设置热盖温度至105℃左右）。

退火延伸时间：100重PCR推荐4 min；1000重推荐8-10 min需要自己根据引物情况摸索。

PCR产物磁珠纯化: 建议在30 μL 反应体系中加27μL磁珠（Cat:12601）进行产物纯化。

第二轮扩增程序

循环步骤	温度（℃）	时间	循环数
预变性	95℃	3 min	1
变性	95℃	20 sec	15-45
退火	60℃	1 min	15-45
延伸	72℃	30 sec
终延伸	72℃	5 min	1

【注】：退火温度和时间：推荐使用60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为30 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

PCR产物磁珠纯化

建议在30 μL 反应体系中加27μL磁珠（Cat:12601）进行产物纯化。

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产品名称	产品编号	规格	价格
2×Hieff^® C1P6 High GC Multiplex PCR Master Mix 2×C1P6高GC多重PCR预混液	YB053G	1 mL	753.00
	YB053G	5×1 mL	2853.00
	YB053G	25 mL	12853.00
	YB053G	50 mL	21853.00

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新产品（仅供科研使用）