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Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina® (96 Index)
Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina® (96 Index)
Product Introduction

Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina® (96 Index)

产品信息

产品名称

货号

规格

价格(元)

Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina® (96 Index)

YB023G

96 T

1365.00


产品描述

Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina®是Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®专用配套试剂盒。其中包含8种N5XX以及12种N7XX,可用于96种不同的双端Index文库制备。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证,最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。


产品组分



组分

Cat#12610(96 rxn)

测序时Index序列

Index名称

N5XX

N501

24 μL

TAGATCGC

Index 2(i5)

N502

24 μL

CTCTCTAT

N503

24 μL

TATCCTCT

N504

24 μL

AGAGTAGA

N505

24 μL

GTAAGGAG

N506

24 μL

ACTGCATA

N507

24 μL

AAGGAGTA

N508

24 μL

CTAAGCCT

N7XX

N701

16 μL

TAAGGCGA

Index 1(i7)

N702

16 μL

CGTACTAG

N703

16 μL

AGGCAGAA

N704

16 μL

TCCTGAGC

N705

16 μL

GGACTCCT

N706

16 μL

TAGGCATG

N707

16 μL

CTCTCTAC

N708

16 μL

CAGAGAGG

N709

16 μL

GCTACGCT

N710

16 μL

CGAGGCTG

N711

16 μL

AAGAGGCA

N712

16 μL

GTAGAGGA


储存及有效期

冰袋运输。

所有组分-20℃贮存,有效期一年。

其他必需材料

Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® (Cat#12206 / Cat#12207)

 

适用范围

Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®专用配套试剂盒,可用于96种不同的双端Index文库制备。


质量控制


16小时孵育检测:50 μL 反应体系中包含5 μL Oligos和1 μg HindIII-λDNA,37 ℃下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解;
50 μL反应体系中包含5 μL Oligos和1 μg T3 DNA,37 ℃下孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,条带无降解。
核酸内切酶残留:50 μL反应体系中加入5 μL Oligos和1 μg φX174 RF I DNA,37 ℃下孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%。


Index选择策略

Illumina使用绿色荧光标记dG/dT,使用红色荧光标记dC/dA。为了保证测序能顺利进行,每个循环里绿色和红色两种荧光信号都必须存在。因此在选择Index时需要考虑绿色信号和红色信号的平衡。下面为推荐的一些Index组合:

表1 Index 选择策略

样品数量

N7XX选择[Index 1(i7)]

N5XX选择[Index 2(i5)]

1

任意N7XX

任意N5XX

2

选择1:N701和N702

任意N5XX

选择2:N702和N704

任意N5XX

3

选择1:N701、N702和N704

任意N5XX

选择2:N703、N705和N706

任意N5XX

4-5

选择1:N701、N702、N704及其他任意N7XX

任意N5XX

选择2:N703、N705、N706及其他任意N7XX

任意N5XX

6

N701、N702、N703、N704、N705和N706

任意N5XX

7-12

选择1:N701-N706及其他任意N7XX

任意N5XX

选择2:N701、N702、N704及其他任意N7XX

选择1:N501和N502

选择2:N503和N504

选择3:N505和N506

选择3:N703、N705、N706及其他任意N7XX

选择1:N501和N502

选择2:N503和N504

选择3:N505和N506

>12

N701-N706及其他任意N7XX

选择1:N501、N502及其他任意N5XX

选择2:N503、N504及其他任意N5XX

选择3:N505、N506及其他任意N5XX

上表仅是一些可以进行测序的Index组合实例,在实际使用过程中也可根据下图示意自行选择适合的index组合.

表2 Index 选择实例

正确选择实例

错误选择实例

样品

数量

样品

编号

N7XX

[Index 1 (i7)]

N5XX

[Index 2 (i5)]

样品

数量

样品

编号

N7XX

[Index 1 (i7)]

N5XX

[Index 2 (i5)]

4

1  N705 GGACTCCT   N503 TATCCTCT                            

4

1  N705  GGACTCCT   N502 CTCTCTAT

2  N706 TAGGCATG   N503 TATCCTCT

2  N706  TAGGCATG   N502 CTCTCTAT

3  N707 TAAGGCGA  N504 AGAGTAGA

3  N707  TAAGGCGA   N503 TATCCTCT

4  N708 CGTACTAG N504 AGAGTAGA

4  N708  CGTACTAG    N503 TATCCTCT

                          √√ √ √ √ √√√         √√ √ √ √ √√√

                        √ √ √ √ √ √ √√           √ √ √ √ × ×××

√: 测序时绿色通道和红色通道都有信号 ×: 测序时只有绿色通道有信号或只有红色通道有信号。


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