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Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

Product Introduction

Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
Hieff Unicon^® TaqMan multiplex qPCR master mix	YB014P	1 mL	1365.00
Hieff Unicon^® TaqMan multiplex qPCR master mix	YB014P	5 mL	5565.00
Hieff Unicon^® TaqMan multiplex qPCR master mix	YB014P	20×5 mL	91265.00

产品描述

本产品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本产品含有基因改造的热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	11208ES03（1 mL）	11208ES08（5 mL）
11208-A	2×Hieff Unicon^® TaqMan multiplex qPCR master mix	1 mL	1 mL × 5
11208-B	50×Low Rox	40 μL	200 μL
11208-C	50×High Rox	40 μL	200 μL

运输与保存方式

冰袋运输，-20℃储存；有效期18个月。

反应体系

反应组分	体积（μL）	终浓度
Hieff Unicon^® TaqMan multiplex qPCR master mix	10	1×
Primer Mix	x	0.1-1 μM
TaqMan Probe Mix	y	50 nM-300 nM
50×High or Low Rox	0.4	1×
模板DNA/cDNA	1-100 ng	-
ddH₂O	up to 20	-

【注】：1）上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量，可根据具体实验情况进行调整，选择最适投入量和浓度；

2）一般情况下，每条引物浓度为0.2 μM即可得到较好的扩增效果，引物浓度可在0.1-1 μM的范围内进行调节；

3）反应体系可根据实验需求进行等比例调节，模板体积不超过总体积的1/10。

扩增程序

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min	1
变性	95℃	5 s	40
退火/延伸	60℃	30 s	40

【注】：1）某些情况下，可通过调节退火延伸时间提高多重qPCR反应的性能。

2）反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性。

注意事项

一、关于操作

1）请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后置于冰上备用。

2）为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。

3）使用过程中避免产品的反复冻融。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

二、实验方法

a：引物设计

1. 引物必须具有特异性。

2. 引物的Tm值必须在58-60℃，而且各组引物的Tm差异应控制在1-2℃。

3. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。

b：探针设计

1. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10℃（68-70℃）。

2. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。

实验案例

检测HEK293T细胞A1、A2、A3、A4基因10倍梯度浓度扩增。

一、反应体系配制

反应组分	体积（μL）	终浓度
Hieff Unicon^® TaqMan multiplex qPCR master mix	10	1×
Primer Mix	0.5	250 nM
TaqMan Probe Mix	0.5	250 nM
50×High or Low Rox	0.4	1×
HEK293T细胞基因组	0.2 ng~200 ng	-
ddH₂O	up to 20	-