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Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile 热敏UDG

Product Introduction

Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile 热敏UDG

产品信息

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile 热敏UDG	YB078P	100U	683.00
	YB078P	500U	3083.00
	YB078P	10000U	43162.00

产品描述

热敏UDG（尿嘧啶-DNA糖基化酶）能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键，释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比，避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用，且对温度敏感、易于灭活。

产品组分

编号	组分	产品编号/规格
编号	组分	YB078P(100 U)	YB078P(500 U)	YB078P（10000U）
10303-A	Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (1 U/μL)	100 μL	500 μL	10 mL

产品应用

1. 去除含dU的PCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

酶活定义

以25℃，30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位（U）。

失活方式

50℃，10 min。

运输储存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期一年。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性。

质量控制

核酸内外切酶残留检测：10 U的本酶和0.6 μg λ DNA-Hind III酶切产物37℃下孵育16 h，DNA的电泳谱带不发生变化。

RNase残留检测：10 U的本酶和1 μg HeLa细胞总RNA在37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带不发生变化。

大肠杆菌DNA残留检测：10 U本品经E.coli16s rDNA特异性的TaqMan qPCR检测，E.coli基因组残留低于10拷贝。

酶失活检测：10 U本品经50℃处理10 min，与1 μg含dU的dsDNA模板温育30 min，DNA的电泳谱带不发生变化。

应用实例

1. 按下列体系配制PCR反应液：

组分	体积（μL）	终浓度
10×PCR Buffer (Mg²⁺Plus)	5	1×
25 mM MgCl₂	3	1.5 mM
dUTP (10 mM)	3	0.6 mM
dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)	1	0.2 mM each
模板DNA	Optional	-
引物1 (10 μM)	2	0.4 μM
引物2 (10 μM)	2	0.4 μM
Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	0.5	0.05 U/μL
Heat-Labile UDG (1 U/μL)	1	1 U/50 μL
ddH₂O	Up to 50

注：根据实验需要，dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP。

2. PCR反应：

反应温度	反应时间	循环数	目的
25℃	10 min	1	降解含U模板
94℃	2 min	1	UDG酶失活，模板预变性
95℃	10 sec	30-35	变性
60℃	20 sec		退火
72℃	30 sec/kb		延伸
72℃	5 min	1	终延伸