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Hieff® Multiplex PCR Kit
Hieff® Multiplex PCR Kit
Product Introduction

Hieff® Multiplex PCR Kit

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff® Multiplex PCR Kit

YB057P

100 T

875.00

Hieff® Multiplex PCR Kit

YB057P

500 T

3165.00


产品描述

本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR Kit以多重PCR酶制剂与2×扩增缓冲液为组分的试剂盒,可快速便捷地用于PCR反应,具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点,可以对20对及以上的引物特异、均一地进行扩增反应。


产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

YB057P(100 T)

YB057P(500 T)

12279-A

Hieff® Multiplex PCR Enzyme

2×50 μL

10×50 μL

12279-B

2×Hieff® Multiplex PCR Buffer

2×1.25 mL

10×1.25 mL

【注】:12279-A组分避免反复冻融。


运输与保存

冰袋运输。-20℃储存,有效期1年。


反应体系

组分

体积 (μL)

终浓

2×Hieff® Multiplex PCR Buffer

25

Hieff® Multiplex PCR Enzyme

1

-

Primer mix

x

0.1 μM-0.5 μM

模板DNA

DNA总量:1 ng-200 ng

-

无菌超纯水

up to 50

-

【注】 

1)上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度,可根据具体实验情况进行调整最适浓度。

2)每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。

3)2×Hieff® Multiplex PCR Buffer中已经包含扩增所需要的Mg2+dNTP、盐离子等,无需额外添加。


扩增程序

循环步骤

温度(

时间

循环数

预变性

94

1 min

1

变性

94

30 sec

15-45

退火

50-60

60 sec

延伸

72

60 sec/kb

终延伸

72

10 min

1

【注】

1)在PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应(设置热盖温度至105℃左右)

2)使用本产品获得的扩增产物无需添加上样缓冲液,可直接上样用于电泳检测。

3)延伸时间以最长扩增片段为准,可适当延长延伸时间,但要避免过长时间带来的非特异性扩增。


实验案例分享

以人基因组DNA为模板,使用10对引物进行多重PCR反应,分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。


反应体系配制

组分

体积 (μL)

终浓

2×Hieff® Multiplex PCR Buffer

25

Hieff® Multiplex PCR Enzyme

1

-

Primer mix

10

0.1 μM

模板DNA

1

2 ng/μL

无菌超纯水

up to 50

-


扩增程序

循环步骤

温度(

时间

循环数

预变性

94

1 min

1

变性

94

30 sec

35

退火

60

60 sec

延伸

72

60 sec/kb

终延伸

72

10 min

1


电泳检测

2%琼脂糖凝胶;电压130 V;电泳时间30 min。


实验结果

1569488999548423.png
 M:100 bp DNA ladder
Lane1-2:10重PCR产物


 部门

姓名

Email

手机 QQ
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