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Hieff® Multiplex PCR Master Mix
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix |
YB058P |
100 T |
875.00 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix |
YB058P |
500 T |
3165.00 |
产品描述
本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR Master Mix为多重PCR酶制剂与扩增缓冲液的2×预混液,可以快速便捷地用于PCR反应,具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点,可以对20对及以上的引物进行特异、均一地进行扩增反应。
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃储存,有效期1年。
反应体系
组分 |
体积 μL |
终浓度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix |
25 |
1× |
Primer mix |
x |
0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA |
DNA总量:1 ng-200 ng |
- |
无菌超纯水 |
up to 50 |
- |
【注】:
1)上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度,可根据具体实验情况进行调整最适浓度。
2)每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。
3)Hieff® Multiplex PCR Master Mix中已经包含扩增所需要的酶、dNTP、盐离子等,无需额外添加。
扩增程序
循环步骤 |
温度(℃) |
时间 |
循环数 |
预变性 |
94 |
1 min |
1 |
变性 |
94 |
30 sec |
15-45 |
退火 |
50-60 |
60 sec |
|
延伸 |
72 |
60 sec/kb |
|
终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
【注】:
1)在PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应(设置热盖温度至105℃左右)。
2)使用本产品获得的扩增产物无需添加上样缓冲液,可直接上样用于电泳检测。
3)延伸时间以最长扩增片段为准,可适当延长延伸时间,但要避免过长时间的延伸带来的非特异性扩增。
实验案例分享
以人基因组DNA为模板,使用10对引物进行多重PCR反应,分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反应体系配制
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix |
25 |
1× |
Primer mix |
x |
0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA |
DNA总量:1 ng-200 ng |
- |
无菌超纯水 |
up to 50 |
- |
扩增程序
循环步骤 |
温度(℃) |
时间 |
循环数 |
预变性 |
94 |
1 min |
1 |
变性 |
94 |
30 sec |
35 |
退火 |
60 |
60 sec |
|
延伸 |
72 |
60 sec/kb |
|
终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
电泳检测
2%琼脂糖凝胶;电压130 V;电泳时间30 min。
实验结果
M:100 bp DNA ladder
Lane1-2:10重PCR产物
部门 |
姓名 | 手机 | |||
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销售: 18321282235
86-21-60514606
技术: 13816899465
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