TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞

产品信息

产品描述

本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本品使用pUC18质粒检测，转化效率可达10⁸ cfu/μg DNA以上，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。可用于构建克隆，蓝白斑筛选（不需要额外添加IPTG来诱导lacZ表达）等，具有链霉素(Str^R )抗性。

TOP10感受态细胞基因型：F^-mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) 80lacZ△M15 △lac X74 recA1 ara△139△(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (Str^R ) endA1 nupG

产品组分

运输与保存方法

干冰运输；-80℃保存，有效期6个月。

注意事项

1. 本产品应保存在-80℃，不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。

2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率最高。

3. 进行蓝白斑筛选时，仅需在平板上预先涂布X-gal即可，无需添加IPTG。

使用方法

1. 取100 μL感受态细胞，冰浴、解冻。

注：感受态细胞的建议用量为50-100 μL，解冻后的感受态细胞不建议二次使用。
2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置30 min。
注：所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

3. 42℃水浴中热激90 s，然后快速将EP管转移到冰上，静置2 min。
4. 向感受态细胞中加入900 μL左右不含抗生素的LB或SOC培养基，混匀。置于37℃摇床温育45 min。

5. 取不同体积的转化产物，涂布至培养板中，37℃培养12-16 h。