IPTG 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷

产品信息

产品描述

异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质，常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等。当pUC系列的载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

产品性质

运输与保存方法

冰袋运输。粉末-20 ℃避光保存。

注意事项

1）含有IPTG的培养基4℃避光保存，须在1周内使用。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液配制

1）称取0.238 g IPTG；加入10 mL去离子水充分溶解IPTG粉末，配制0.1 M的储存液；

2）用5-10 mL去离子水润湿0.22 μm针孔过滤；

3）0.22 μm滤膜除菌上述IPTG溶液。分装成1 mL，-20℃冻存，有效期可达1年。

蓝白斑筛选

1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液

1）高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到50℃左右。

2）每毫升培养基内加入10 μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其终浓度达到1 mM）；

3）加入适量抗生素；

4）混匀后按照平板大小倒入适量培养基，待培养基冷却至室温后，接种细菌于37℃过夜培养。

2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面

1）于无菌超净工作台制备平板（如LB 琼脂板）；

2）取40 μL 0.1 M IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合，均匀地涂布于准备好的平板上；

【注】：平板边缘较难充分涂布均匀，容易产生假阳性，因此，为了得到更好结果，建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。

3）37℃孵育直至所有液体被吸收（30 min或更长）。接种细菌于37℃过夜培养直到菌落形成。