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T4 RNA Ligase 1 T4 RNA连接酶1
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
T4 RNA Ligase 1 T4 RNA连接酶1 |
YB018K |
1000 U |
565.00 |
T4 RNA Ligase 1 T4 RNA连接酶1 |
YB018K |
10000 U |
3465.00 |
产品描述
T4 RNA连接酶1是一种ATP依赖的、可催化ssRNA、ssDNA或单核苷酸分子之间或分子内5´磷酸末端和3´羟基末端形成磷酸二酯键的酶,该过程中ATP水解为AMP和PPi。本品来源于携带T4 RNA连接酶1基因的E.coli菌株。
产品应用
1. RNA 3´-末端标记
2. ssRNA和ssDNA分子内或分子间的连接
3. 合成单链寡脱氧核苷酸
4. RNA环化
产品组分
类别 |
编号 |
组分 |
产品编码/规格 |
储存 |
|
11068ES80(1000 U) |
11068ES92(10000 U) |
||||
Part Ⅰ |
11068-A |
T4 RNA Ligase (10 U/μL) |
100 μL |
1 mL |
-20℃ |
Part Ⅱ |
11068-B |
10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer |
300 μL |
3 mL |
-20℃或-80℃ |
11068-C |
ATP (10 mM) |
50 μL |
500 μL |
||
11068-D |
50% PEG 8000 |
500 μL |
5 mL |
运输方法
冰袋运输。
保存方法
1. 试剂Part Ⅰ:-20℃保存,避免反复冻融。
2. 试剂Part Ⅱ:-20℃保存,1个月。-80℃,长期保存。避免反复冻融。
单位定义
37℃条件下,30 min内将1 nmol的5´-[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量为1个酶活单位。
注意事项
可根据具体应用选择合适的操作方法,可能需准备额外的试剂,如RNase inhibitor (钰博生物,Cat No.10603)。
操作方法
一、用于RNA环化
1. 配制反应体系(20 μL反应体系)
在RNase free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。
组分 |
加入量 |
终浓度 |
10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer |
2 μL |
1× |
50% PEG 8000 |
4 μL |
10% |
ATP (10 mM) |
0.04-0.1 μL |
20-50 μM |
RNase inhibitor (40 U/μL) |
0.5 μL |
1 U/μL |
RNA |
- |
10 μM |
T4 RNA Ligase (10 U/μL) |
1 μL |
0.5 U/μL |
Nuclease-free water |
Up to 20 μL |
- |
【注】:1)试剂使用:使用前充分解冻混匀。
2)T4 RNA连接酶添加:建议在最后一步加到反应体系中。
2. 反应程序
1)孵育:25℃ 1-2 h。如果是更长的寡核苷酸,16℃过夜可以增加产量。
2)终止反应:95℃ 2 min或65℃ 15 min。
部门 |
姓名 | 手机 | |||
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