一管式反转录试剂盒（RT MIX）

产品及特点 本产品是一管式反转录预混 Mix，内含反转录一链合成所需的所有试剂（MMLV、Random primers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应 Buffer 等），用户只需加入模板 RNA 和 RNase-Free 水即可进行反应。本产品特点如下：

1. cDNA 的合成更加方便，用户只需准备模板和水即可进行反应。

2. 快捷，操作步骤已经大限度地简化，能减少污染，降低实验误差。

3. 效率高，特殊优化的 oligo dT 和 N6 随机引物配比，反转录效率高。

4. 速度快，只需 42℃，20 分钟即可完成 cDNA 一链的合成。

5. 能够用于 GC 含量高，二级结构复杂的 RNA 模板，合成 cDNA 片段长度可达 12kb。

6. 兼容性好，合成的 cDNA 可直接用于荧光定量 PCR 反应，灵敏度高、稳定性好。
规格及成分 成 份 编 号 10 次包装 50 次包装
2×RT MasterMix 170403 0.1 mL 0.5 mL
RNase-Free 水 80403 1 mL 1 mL
使用手册 1 份

运输及保存 低温运输，-20℃保存, 有效期一年。

自备试剂 RNA 模板。

使用方法1. 解冻后颠倒轻弹混匀各组分，以 20 uL 体系为例，按下表加入（2×RT Master Mix很粘稠，取用前请短暂离心，并避免吸头外壁沾附损失）：

2×RT MasterMix 10 uL

Total RNA/mRNA 模板(自备) 50 ng-2 ug/5-200ng

补 RNase-Free 水到 20 uL

注意：对亍二级结构很复杂的 RNA 模板，推荐使用变性步骤，即在操作步骤之前，将模板 RNA 在 65℃孵育 5 分钟后迅速转移到冰上，再进行下一步操作。

2. 轻轻混匀，42℃孵育 20 分钟进行反转录反应。

注意：对亍二级结构复杂或者 GC 含量高的模板，可以提高温度至 50℃，以增强反转录效率。

3. 85℃加热 5 秒钟灭活反转录酶置冰上备用（更长时间保存请置于-20℃）。