DNase I溶液，10mg/mL

产品及特点 DNase I 全名是 Deoxyribonuclease I，中文名称是脱氧核糖核酸酶 I。它从牛胰腺纯化得到是一种可以消化单链或双链 DNA 产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶，分子量约 32kDa（单体）。DNase I 水解单链或双

链 DNA 后的产物，5'端为磷酸基团，3'端为羟基。其活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I 可随机剪切双链 DNA 的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I 可在同一位点剪切 DNA 双链，形成平末端，或 1-2 个核苷酸突出的粘末端。本产品是 DNase I 的 10mg/mL 的溶液，酶活性为 1500-2500 U/mg，它具有下列特点：

1. 即开即用，不需要用户单独配置。

2. 可用于制备 RNase-free 的 DNase。本产品为粗制品，可能含残留的RNase，不能直接用于清除 RNA 样品中的 DNA。

3. 本产品可直接用于 DNase I Footprinting 实验、缺口平移（NickTranslation）、制备 DNA 随机片断文库、制备 TUNEL 检测中的阳性对照。

规格及成分 成份 编号 1.5mL 塑料管包装

DNase I 溶液（10mg/mL） 130984 1.5 mL

使用手册 1 份

运输及保存 低温运输、-20℃保存，有效期一年。

自备试剂

使用方法 使用方法

本产品可用于 DNase I Footprinting 实验、缺口平移（Nick Translation）、制备 DNA 随机片断文库、TUNEL 检测中剪切基因组 DNA 作为阳性对照。具体使用方法请参考相关资料。

注意：本产品浓度较高，如需对其进行稀释，需要自备 DNase I 储存液。DNase

I 储存液的配方是：50mM Tris-acetate（pH 7.5），10mM CaCl2，50%（v/v）甘油。

附录 1. DNase I 活性定义：37℃10 分钟内，将能够完全降解 1μg pBR322 质粒 DNA所需的酶量定义为 1 个活性单位。

2. DNase I 活性检测条件：40mM Tris-HCl（pH8.0），10mM MgSO4，1mMCaCl2，1μg of pBR322 DNA。

3. 纯度：不含其它 DNA 内切酶和外切酶。

4. DNase I 酶储存溶液：50mM Tris-acetate（pH7.5），10mM CaCl2，50%（v/v）甘油。

5. DNase I 酶反应液（10X）：100mM Tris-HCl（pH7.5 at 25℃），25mMMgCl2，1mM CaCl2。

6. 失活或抑制：加入 EDTA 至终浓度为 2.5mM 后，65℃加热 10 分钟可使DNase I 失活。酚氯仿抽提也可以使 DNase I 失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子、0.1%的 SDS、DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100mM 以上盐浓度均对 DNase I 有显著抑制作用。